elisa實驗:引起酶免反應(yīng)顯色淡,靈敏度偏低的原因
引起酶免反應(yīng)顯色淡、靈敏度偏低有很多種因素,下面BUNSEN本生小編給大家介紹幾種可能的較常見的原因:
1. 試劑盒在運輸途中時間太長,溫度太高;要求運輸時置于保溫箱內(nèi)運輸,并放足夠數(shù)量的冰塊,盡量縮短運輸時間。
2. 試劑盒超過有效期;建議不要使用超過效期的試劑盒。
3. 試劑、樣品使用未能平衡;建議使用于室溫平衡30分鐘左右。
4. 試劑開啟時間過長,長菌;建議試劑開啟后應(yīng)該于半個月內(nèi)用完。
5. 移液器吸量不足,移液抽吸排放太快,吸頭內(nèi)壁掛液太多或內(nèi)壁不清潔。建議使用一次性的吸頭。
6. 恒溫箱溫度不足37℃ (或水浴鍋溫度不足37℃);建議孵育反應(yīng)期間應(yīng)該控制好溫度。
7. 孵育反應(yīng)時間不足;建議應(yīng)準(zhǔn)確記時。
8. 洗滌時沖擊力太大,洗滌液浸泡時間太長,洗滌次數(shù)增加。建議減少洗滌沖擊力,按說明書要求的時間,準(zhǔn)確記錄洗滌時間。
9. 顯色劑滴加量不足或順序顛倒,或混合后加入;建議應(yīng)該先加顯色劑A,后加顯色劑B,不可將A、B液混合后加入。
10. 顯色劑反應(yīng)時間不足;建議準(zhǔn)確記時。
11. 蒸餾水水質(zhì)有問題;建議檢查蒸餾水。
12. 樣品用疊氮鈉防腐,抑制了酶的反應(yīng);建議不能加疊氮鈉防腐。
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